MECANISMOS DE OTIMIZAÇÃO DE PROTOCOLOS PARA EXTRAÇÃO DE DNA GENÔMICO DE SISAL

Resumo

A Agave Sisalana Perr. (Sisal) pertence à família Agavaceae, e tem como principal produto de interesse comercial suas fibras resistentes extraídas das folhas. O Brasil se destaca na agaveicultura como o maior produtor e exportador mundial da fibra. Segundo a Conab, no ano de 2015, a produção brasileira correspondeu a cerca de 91,1 mil toneladas, 80% dessa produção foi destinada ao mercado externo (Conab, 2015).
Apesar da importância econômica das fibras de sisal, poucas pesquisas relacionadas a planta foram desenvolvidas, principalmente no que concerne ao melhoramento genético da espécie de modo que quase todo o sisal cultivado mundialmente possui, provavelmente, a mesma constituição genética (Gondin et al., 2009). O melhoramento da espécie via hibridação buscou ampliar a base genética, entretanto, a técnica não produziu resultados satisfatórios. Ademais, progressos em programas de melhoramento de qualquer espécie, no que diz respeito a melhoria de qualquer atributo biológico, tem como base a presença ou criação de variabilidade. Desse modo, torna-se imprescindível conhecer a diversidade genética existente entre e dentre as populações (Stefenon, 2003).
A diversidade genética de uma espécie pode ser detectada utilizando descritores morfológicos e/ou agronômicos. Porém, uma identificação e quantificação mais eficiente e fidedigna desta variabilidade pode ser executada com o auxílio de ferramentas biotecnológicas, destacando os marcadores moleculares. Estes são ferramentas eficazes, pois permitem identificar polimorfismo tendo como base a análise do DNA do vegetal. Para detecção destas informações, faz-se necessário, inicialmente, o estabelecimento de protocolos de extração do DNA genômico. Dentro desta perspectiva, nota-se que a extração de DNA é essencial para o estudo da diversidade genética, pois permite a obtenção de DNA integro e em quantidade satisfatória para amplificações reproduzíveis e confiáveis (Milach, 1998).
A extração de DNA é a primeira etapa para a utilização de genomas em diferentes técnicas da genética molecular, e a sua pureza e qualidade são sempre os pré-requisitos principais (Arbi et al., 2010). O DNA isolado deve estar livre de contaminantes, como polissacarídeos, proteínas e substâncias fenólicas. Nesse sentido, é fundamental seguir todos os procedimentos do protocolo estabelecido (Mazza e Bittencourt, 2000). Portanto, o presente trabalho teve por objetivo otimizar protocolos de extração de DNA de Agave sisalana Perrine apresentando um DNA íntegro e com qualidade satisfatória para estudos de divergência genética da espécie.