AVALIAÇÃO DA TÉCNICA DE CONCENTRAÇÃO DE OVOS DE TOXOCARA CANIS A PARTIR DE AMOSTRAS DE SOLO ARTIFICIALMENTE CONTAMINADAS

Résumé

O Toxocara canis é um nematelminto parasito do cão causador de uma infecção em humanos denominada toxocaríase, sendo assim importante agente zoonótico. Esta espécie é do gênero Toxocara que faz parte da família Ascaridae, vive no intestino delgado do cão e de canídeos selvagens (Rey, 2001).
O ciclo do Toxocara spp. inclui uma fase no solo onde os ovos liberados no ambiente juntamente com as fezes dos hospedeiros definitivos (como os cães), se desenvolvem e a larva dentro do ovo atinge o estádio infectante (L3). Esses ovos são muito resistentes aos fatores ambientais e podem permanecer viáveis durante meses (Neves et al., 2011). Dessa maneira, os trabalhos realizados buscando avaliar o nível de contaminação do ambiente por Toxocara spp. são feitos em amostras de solo em geral pela técnica de flutuação com soluções de alta concentração de soluto, fazendo assim com que os ovos flutuem e se concentrem na superfície da solução líquida. Apesar dessa técnica ser eficaz na visualização de ovos de Toxocara spp. sendo possível até observar se estão larvados, morulados ou inférteis, não é possível fazer a diferenciação entre as espécies Toxocara canis e Toxocara cati (que tem por hospedeiro definitivo felídeos, inclusive os gatos domésticos), mas, graças aos avanços da biologia molecular, trabalhos de distinção entre as espécies foram realizados utilizando-se ferramentas de análise molecular. Outro ponto um tanto negativo da técnica é que os resultados, ou seja, a quantidade de ovos encontrados, pode variar em função das condições em que se encontra o solo coletado para a análise, o transito de cães e gatos no local também pode influenciar. Além disso, apesar da técnica empregada em geral ser a de flutuação, não existe um protocolo padrão para a mesma, e os pesquisadores terminam por utilizar soluções com solutos diferentes e em diferentes concentrações, forças diferentes de centrifugação, etc.
Pelo exposto, justifica-se o nosso objetivo de padronização de uma técnica para concentração de ovos de Toxocara spp. em solo, tornando mais fácil a realização e a comparação entre os trabalhos nesse âmbito, permitindo uma concentração maior de ovos e assim ajudando na avaliação da contaminação do ambiente e aumento da eficiência das técnicas de amplificação de DNA, como por exemplo a reação em cadeia pela polimerase (PCR).